詞條
詞條說(shuō)明
MES,也稱為4-嗎啉乙磺酸,是一種兩性離子緩沖液,主要用作在bis-tris凝膠上分辨非常小的蛋白質(zhì)的運(yùn)行緩沖液。MES通常被稱為原始Good's緩沖劑之一。MES溶液的pKa值接近生理pH值,不會(huì)被細(xì)胞膜吸收,并且對(duì)UV光基本上是透明的。MES溶液也用于陽(yáng)離子交換色譜中,并用作植物細(xì)胞培養(yǎng)物中的生物緩沖液,可以通過(guò)用氫氧化鈉滴定游離酸將MES溶液制備到所需的pH。 MES緩沖劑特性 MES是緩
PIPES是乙磺酸緩沖鹽系列之一,全名為1,4-哌嗪二乙烷磺酸,屬于兩性離子生物緩沖劑,同時(shí)也是Good緩沖劑系列之一,CAS號(hào)為7365-45-9。PIPES緩沖劑在常溫下外觀為白色粉末固體,水溶性不佳(1g/L)。如果將PIPES緩沖劑混合等摩爾濃度之鈉鹽,將其制備為PIPES Disodium Salt Buffer與PIPES sesquisodium salt等緩沖劑,可提高其溶解度。
上樣緩沖液即loading buffer,是蛋白質(zhì)、核酸DNA與RNA的研究實(shí)驗(yàn)中溶解和添加樣品時(shí)所用的一類(lèi)上樣緩沖液,蛋白質(zhì)、DNA、RNA是不同的樣品,其上樣緩沖液也有所區(qū)別。 蛋白上樣緩沖液的組成 其緩沖液主要采用Tris-HCl(三羥甲基氨基甲烷鹽酸)或Tris甘氨酸、與EDTA鹽(乙二胺四乙酸二鈉),還需添加SDS,DTT(二流蘇糖醇),溴酚藍(lán),甘油等。 蛋白、DNA、RNA的上樣緩沖液
生物緩沖劑HEPES、PIPES的制備方法及使用注意事項(xiàng)
許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)都需要使用緩沖液來(lái)維持有效的pH,這很重要,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)和酶對(duì)pH的變化敏感,因此為當(dāng)前和下游實(shí)驗(yàn)選擇正確的緩沖液至關(guān)重要。在本文中,我將簡(jiǎn)要討論HEPES和PIPES在配置及使用過(guò)程中要考慮的一些重要因素,希望能對(duì)大家有所幫助。 如何制作HEPES及使用注意事項(xiàng) HEPES是兩性離子Good's緩沖液,在6.8至8.2的pH范圍內(nèi)有效。這使HEPES在生理pH值下成為有效的緩沖液。該
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